（人教版）生物选修一 2.1《微生物的培养与应用--微生物的实验室培养》课件

（人教版）生物选修一 2.1《微生物的培养与应用--微生物的实验室培养》课件内容摘要：

1、 高中生物课件（人教课标版） 专题 2 :微生物的培养与应用 课题 2： 微生物的实验室培养 特点： 结构都相当简单 ,个体多数十分微小 的甚至没有细胞结构 不能进行光合作用 . 微生物包括哪五类： 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 一、基础知识： (一 )微生物 ：是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称 病毒的结构 病毒 禽流感病毒 朊病毒（蛋白质病毒） 病毒的增殖： 细菌的外形与大小 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做 芽孢。 芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 例如，有的细菌的芽孢，煮沸 3小 2、时以后才死亡。 芽孢又小又轻，可以随风飘散。 当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌 . 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 细菌的营养类型 根据细菌所利用的 能源和碳源 的不同，将细菌分为两大营养类型。 自养菌 :分类 ,举例 ? 异养菌 : 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 光合自养型 :光合细菌 化能自养型 :硝化细菌 ,铁细菌 ,硫细菌 菌落 细菌的菌落特征因种而异 放线菌 1、结构： 单细胞原核 分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝） 链霉素、土霉素、四环素、 3、氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其中 2/3是 由放线菌产生的 应用 : 真菌 如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构 酵母菌和霉菌 青霉 生殖 直立菌丝 营养菌丝 腐生生活 孢子生殖 （二）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 （ 1）按物理状态分： 固体培养基 和 液体培养基、半固体培养基。 （ 2）按功能分： 选择培养基 和 鉴别培养基。 （ 3）按成分分： 天然培养基 和 合成培养基。 固体培养基：菌落 液体培养基： 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 半固体培养基： 无动力 有动力 (弥散 ) 般都含有 水 、 碳 4、源 、和 氮源 、 无机盐 、 等 营养物质，另外还需要满足微生物生长对 特殊营养物质以及氧气的要求 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种 半固体培养基：动力检测 （三）无菌技术 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 成功地培养微生物的关键。 （） 消毒定义： （ 2）灭菌的定义： 1、灼烧灭菌 灭菌的方法： 2、干热灭菌： 160 下加热1 3、高压蒸气灭菌：100121 下维持 15有什么目的。 果需要，请选择合适的方法。 （ 1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （ 2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （ 3） 实验操作者的双手 答： 5、无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（ 1）、（ 2）需要灭菌；（ 3）需要消毒。 微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 三、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（ 用于培养细菌 ） 1计算、称量 2溶化 3调 6 4过滤：这一步可以省去。 5分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。 分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6加塞 7包扎 操作步骤 8灭菌 : 将 50上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为 100温 6、度为 121 ，灭菌15 30将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在 160 170 下灭菌 2h。 9倒平板 : 待培养基冷却到 50 左右时，在酒精灯附近倒平板。 （倒平板操作见课本） 2杂菌污染才可用来接种 . 10无菌检查： 将灭菌的培养基放入 37 的温室中培养 24 48小时，以检查灭菌是否彻底。 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 微生物的接种技术： 平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法 平板划线的操作 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落 7、。 划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗。 为什么。 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 什么要等其冷却后再进行划线。 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 什么总是从上一次划线的末端开始划线。 答： 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始， 能使细菌的数 8、目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 稀释涂布平板法 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。 结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第 2步应如何进行无菌操作。 应从操作的各个细节保证“无菌”。 例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后臵于 4 冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 本课题知识小结 : 四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温 1 2 明培 9、养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养 12 4 时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。 这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。 【 典例解析 】 例 1关微生物营养物质的叙述中，正确的 解析： 不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。 对于 A、 的表达是不完整的。 有的 10、碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如 的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。 对于 水以外的无机物种类繁多，功能也多样。 如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源； 作为自养型微生物的碳源和无机盐；而 于 机氮源提供能量的情况还是存在的，如 答案： D 例 2下面对发酵工程中灭菌的理解 不正确 的是 答案： B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。 为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的； 为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。 为与发酵有关的所有设备和物质都要灭 11、菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。 编号 成分 含量 粉状硫 10g （ 00 3右表是某微生物培养基成分，请据此回答： （ 1）右表培养基可培养的微生物类型是。 （ 2）若不慎将过量 如不想浪费此培养基，可再加入 . 自养型微生物 含碳有机物 （ 3）若除去成分，加入（ 该培养基可用于培养。 （ 4）表中营养成分共有 类。 （ 5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是。 （ 6）右表中各成分重量确定的原则是。 （ 7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分。 固氮微生物 3 调整 依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂） 了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标： 掌握 培养基的制备 、 高压蒸气灭菌 和 平板划线法 等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点： 三、技能目标： 倒平板技术 要冷却到 50 左右时，才能用来倒平板。 你用什么办法来估计培养基的温度。 答： 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 什么要将平板倒臵。