新人教版生物选修1课题3血红蛋白的提取和分离之一

新人教版生物选修1课题3血红蛋白的提取和分离之一内容摘要：

）体积，再加 40％体积的（ ）（ 溶解细胞膜 ） ，置于（ ）上充分搅拌10分钟（加速细胞破裂） , 细胞破裂释放出血红蛋白 . (3)分离血红蛋白溶液：将搅拌好混合液转移到离心管内，以 2020r/min的速度离心 10 min ，试管中的溶液分为 4层 : 原血液 甲苯 磁力搅拌器 蒸馏水 第 1层（最上层）： （ ）甲苯层 第 2层（中上层）： （ ） 的沉淀层， （ ）色薄层固体 第 3层（中下层）： （ ） 的水溶液层 （ ）的液体 第 4层（最下层）： 其它杂质（ ）的沉淀层 无色透明 脂溶性物质 白 血红蛋白 红色透明 暗红色 用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后， 分出下层的红色透明液体。 取 ( )ml的血红蛋白溶液装入（ ）中，将透析袋放入盛有 300ml的物质的量浓度为 20mmol/L的（ ）中，pH为（ ），透析 12小时，目的是（ ）或用于更换样品中的（ ）。 透析袋一般用 硝酸纤维素 制成，又称玻璃纸。 除去样品中分子量较小的杂质 透析袋 磷酸缓冲液 缓冲液 (4)透析 1 1）凝胶色谱柱的制作 ① 取长 40厘米，内径 管，两端需用砂纸磨平。 ② 底塞的制作： 打孔 挖出凹穴 安装移液管头部 覆盖尼龙网 ，再用 100目尼龙纱包好。 a、选择合适的的橡皮塞，中间打孔； b、在橡皮塞顶部切出锅底状的（ ），在 （ ）头部切下（ ）长的一段，插入橡皮塞孔内，上部不得超过橡皮塞的凹穴底面。 凹穴 移液管 5cm 底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否则难以铺实尼龙网，还会导致液体残留，蛋白质分离不彻底。 （ ）上，用（ ）的尼龙纱将橡皮塞（ ）包好，插到玻璃管一端。 d、色谱柱下端用移液头部做（ ），连接一细的（ ），并用螺旋夹控制尼龙管的（ ），另一端放入收集（ ）的收集器内 橡皮塞的凹面 100目 上部 出口部位 尼龙管 打开与关闭 色谱流出液 ⑤ 安装其他附属结构。 ③ 顶塞的制作： 插入安装了玻璃管的橡皮塞 ④ 组装：将上述三者按相应位置组装成一个整体。 2）凝胶色谱柱填料的处理 （ 1）凝胶的选择： （ ）（ G75） “ G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度 及分离范围。 75表示凝胶的得水值，即每克凝胶 膨胀时吸水。 （ 2）方法： 配置凝胶悬浮液：计算并称取一定量的凝胶浸泡于（ ）中充分溶胀后，配成（ ）。 蒸馏水 凝胶悬浮液 交联葡聚糖凝胶① 固定：将色谱柱处置固定在支架上 ② 装填： 将（。