2016届高考生物专题复习课件（15）微生物的培养与应用（共28张PPT）

2016届高考生物专题复习课件（15）微生物的培养与应用（共28张PPT）内容摘要：

1、考点 49 微生物的培养 考点 50 微生物的应用 理想树出品 高考考法突破 考法 1 微生物的培养和分离 应试基础必备 考点 49 微生物的培养 考点 49 微生物的培养 考法 2 微生物的筛选与计数 应试基础必备 1微生物的培养 (1)培养基 概念：人们按照微生物对 营养物质 的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养物质。 成分：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，还需满足不同微生物生长对 殊营养物质以及氧气的需求。 培养基的制备：计算 称量 溶化 灭菌 倒平板。 (2)无菌技术 关键：防止外来杂菌的入侵。 方法：实验室中常用 紫外线 或 化学药物 消毒，如用酒精擦拭双手；灭菌的方法主要有灼烧 2、灭菌、干热灭菌和 高压蒸汽 灭菌。 (3)实验操作 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 a步骤：计算 称量 溶化 灭菌 倒平板。 b倒平板操作时待培养基冷却至 50度 左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 纯化大肠杆菌 a原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成 单个 菌落，这个菌落就是一个 纯化的细菌菌落。 b方法： 平板划线 法 、 稀释涂布平板 法。 考点 49 微生物的培养 应试基础必备 菌种的保藏 a短期保存：固体斜面培养基上 4 保存，菌种易被污染或产生变异。 b长期保存：甘油瓶中 20 冷冻箱中保藏。 2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)筛选菌株 原理：人为提供有利目的菌生 3、长的条件，同时 抑制或阻止 其他微生物的生长。 (2)统计菌落数目的方法 显微镜直接计数法 a原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算 一定容积 的样品中微生物的数量。 b方法：用计数板计数。 c缺点：不能区分死菌与活菌。 间接计数法 (活菌计数法 ) A原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌。 B计算公式：每克样品中的菌株数 (C V) M，其中 C操作 a设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30 300的平板进行计数。 (3)实验流程： 4、土壤取样 制备培养基 微生物的培养与观察 细菌的计数。 考点 49 微生物的培养 应试基础必备 3培养基对微生物的选择作用 (1)纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶，它包括 有催化分解纤维素的作用，其作用过程如下： (2)纤维素分解菌的筛选原理 以纤维素作为唯一碳源的选择培养基上，刚果红纤维素 红色复合物，纤维素分解菌可分泌纤维素酶，分解纤维素使红色消失，出现透明圈。 即：可根据透明圈来筛选纤维素分解菌。 (3)土壤中纤维素分解菌的筛选流程 土壤取样 (要在富含纤维素的环境中取样 )选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落。 返回考点目录 考点 49 微生物的 5、培养 高考考法突破 角度 1 对培养基的认识 1培养基的成分 考法 1 微生物的培养和分离 考点 49 微生物的培养 营养物质 含义 作用 主要来源 碳源 能提供碳元素的物质 构成生物体的物质，异养生物的能 源物质 无机物： 有机物：糖类 、 脂肪酸 、 石油 、 花生粉饼等 氮源 能提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产 物 无机物： 铵盐 、 硝酸盐； 有机物：尿素 、 牛肉膏 、 蛋白胨等 生长因子 生长必不可少的微量有机物 酶和核酸的成分 维生素 、 氨基酸 、 碱基等 水 细胞生命活动必不可少的物质 不仅是良好的溶剂，还是结构物质 培养基 、 大气 、 代谢产物 无机盐 提 6、供除碳、氮元素以外的各种重要元素，包括某些大量元素 细胞内的组成成分；生理调节物质；某些化能自养型细菌的能源；酶的激活剂等 培养基 高考考法突破 2培养基的分类 考点 49 微生物的培养 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 固体培养基 加凝固剂，如琼脂 对微生物分离、鉴定等 化学成分 天然培养基 利用动植物、微生物细胞包括其提取物配 制而成的培养基，所含化学成分不明确 工业生产 合成培养基 用成分已知的化学物质配制而成 分类、鉴定 半合成培养基 培养基成分有已明确的，也有天然成分 促进菌丝生长发育 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，用来抑制 7、不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养和分离出特定微生物 (如分离细菌和真菌，可以在培养基中加入青霉素 ) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点 ， 在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 ， 如用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌 (若有 ， 则菌落呈黑色并带有金属光泽 ) 3培养基的配制原则 (1)目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等选择原料配制培养基，如培养自养型的微生物就不用加入有机营养物质。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 (3)种微生物适宜生长的 高考考法突破 (4)自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据：能否以无 8、机碳作为生长的主要或唯一碳源，而与氮源无关。 自养微生物以 养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。 (5)营养成分不同 考点 49 微生物的培养 (6)微生物最常用的碳源和氮源：最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是铵盐和硝酸盐。 对异养微生物来说，含 C、 H、 O、 是氮源。 4琼脂的作用： 加入培养基中的琼脂只能起到凝固作用，一般不能被微生物利用。 5选择培养基和鉴别培养基的辨析： 选择培养基一般只生长特定的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。 营养类型 碳源 氮源 生长因子 自养型 盐、硝酸盐等 一般不需要 异养型 糖类、脂肪酸等 铵盐、硝酸盐、蛋白 9、质等 有些微生物需要 角度 2 无菌技术操作的方法 1灭菌的方法与原理 高考考法突破 (3)酒精灯灼烧法：适用于操作时试管口及接种环的灭菌。 以上三种高温灭菌的原理是使细菌体内蛋白质变性而达到杀灭细菌的目的。 2消毒的方法 (1)煮沸消毒法： 100 煮沸 5 6 以杀死微生物细胞，可用于饮水和餐具的消毒。 (2)巴氏消毒法： 80 煮 15 0 75 煮 30 际生产中常用于鲜奶的消毒。 (3)70%酒精消毒法： 70%酒精杀菌能力最强，常用于实验时操作者手的消毒。 体积分数为 70%的酒精杀菌效果最好的原因是如果浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，则杀 10、菌能力减弱。 考点 49 微生物的培养 高考考法突破 3消毒和灭菌的比较 考点 49 微生物的培养 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物 (不包括芽孢和孢子 ) 煮沸消毒法 (日常用品 )、 巴氏消毒法 (不耐高温的液体 )、 紫外线或化学药剂消毒法 (用酒精擦拭双手 ， 用氯气消毒水源 ) 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物 ，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌 (接种工具 )、 干热灭菌 (玻璃器皿 、 金属工具 )、 高压蒸汽灭菌 (培养基及容器 ) 角度 3 平板划线法和稀释涂布平板法对大肠杆菌的纯化的比较 平板划线法 11、稀释涂布平板法 概念 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作 ， 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的不同区域。 在数次划线后培养 ， 可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落 将菌液进行一系列梯度稀释 ， 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 ， 进行培养。 在稀释度足够高的菌液里 ， 聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞 ， 从而能在培养基表面形成单个的菌落 示意图 高考考法突破 考点 49 微生物的培养 操作 第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环进行灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环 (灭菌的目的各不相同：第一次操作是为了杀死接种环上原有的微生物；每次划线之前灭菌是为了杀 12、死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端；划线结束后灭菌是为了杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 )。 灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 划线时最后一区域不要与第一区域相连。 划线用力要适当，防止用力过大将培养基划破 稀释操作时：每支试管及其中的 9 移液管均需灭菌；操作试管口和移液管应在离火焰 1处 涂布平板时： 0%的酒精消毒 ， 取出时 ， 多余酒精在烧杯中滴尽 ， 然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃； 以免引燃其中的酒精； 移液管头不要接触任何物体 缺点 不易分离出单个菌落，不能计数 能使单菌落分离，便于 13、计数，但统计样品中菌落的数目往往比实际数目低 (因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 ) 目的 在培养基上形成由单个菌体繁殖而来的菌落 培养 平板冷凝后要倒置培养 ， 使培养基表面的水分更好地挥发 ， 防止皿盖上水珠落入培养基造成污染 高考考法突破 考点 49 微生物的培养 角度 4 分离微生物的方法 (1)改变培养基中的营养成分，如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物。 (2)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离出能消除石油污染的微生物的目的。 (3)当培养基中加入抗生素时 14、，如加入青霉素、链霉素，可以抑制细菌的生存，从而分离出真菌等真核微生物。 角度 5 关于透明圈 1抗生素与透明圈的关系：抗生素是由真菌产生的、可以抑制细菌的生长、繁殖甚至杀死细菌的一类物质。 用含抗生素的滤纸片均匀置于平板培养基上的不同位置，培养一段时间后，某种细菌形成的透明圈越大，说明该细菌对该抗生素越敏感，抑菌能力越强。 若不出现透明圈，说明该细菌对该抗生素不敏感。 2分解圈 (或透明圈 )的大小与降解能力的关系：在固体培养基中渗入溶解性差、可被特定菌利用的营养成分，造成浑浊、不透明的培养基背景。 接种培养后待筛选的菌落周围就会形成分解圈 (或透明圈 )，分解圈 (或透明圈 )的大小反映了菌落利用此物质的能力。 常作为初步筛选菌落的快速方法。 如在培养基中掺入可溶性淀粉、酪素或原油可以分别用于检测菌株产淀粉酶、产蛋白酶或降解原油能力的大小。 返回考法 考点 49 微生物的培养 高考考法突破 考点 49 微生物的培养 1检测培养基是否被污染的方法：将未接种的培养基放在适宜温度下培养，若培养基上有菌落说明培养基被污染，无菌落说明未被污染。 2两种常用刚果红 (CR。