分子生物学检验技术课程教学大纲

分子生物学检验技术课程教学大纲内容摘要：

作用的研究方法有哪些。 二维电泳的基本原理是什么。 第六章 核酸的分离和纯化 第一节 核酸分离与纯化的设计与原则 【掌握】核酸的浓度和纯度鉴定。 第二节 基因组 DNA的分离与纯化 【 掌握】基因组 DNA的分离方法和原理。 第三节 质粒 DNA的提取与纯化 【掌握】质粒 DNA分离方法和原理。 第四节 RNA的分离与纯化 【熟悉】 RNA抽提， mRNA的分离和纯化。 思考题： 酚 氯仿法抽提基因组 DNA的原理。 质粒制备的主要方法是什么。 并阐明其基本原理。 如何鉴定核酸的浓度和纯度。 第七章 DNA重组技术 第一节 工具酶 【掌握】基因重组的主要工具酶和它们的作用。 第二节 DNA重组载体 【掌握】 DNA重组的主要载体和它们各自的优点。 第三节 DNA重组与鉴定 【熟悉】克隆和 DNA重组的概念，基因重组的基本步骤，载体的概念及特征，载体的筛选标志和筛选方法，转化、转染、转导的概念、感受态菌的概念。 【了解】基因重组的发展历史，重组 DNA技术意义。 第四节 外源基因 的蛋白表达 【掌握】启动子、增强子、终止子、 p 因子的概念和作用。 融合蛋白的概念以及表达融合蛋白的优点，真核细胞表达元件，哺乳动物基因转移的遗传选择性标记。 【了解】原核和真核生物表达的区别。 表达产物的分离与纯化。 第五节 DNA序列测定 【了解】双脱氧末端终止法测序的原理。 思考题： 一、名词解释：非融合型表达蛋白、融合表达蛋白、包涵体载体、基因克隆、转化、转染、转导、感受态 二、问答题： 基因重组中主要的工具酶有哪些。 它们的基本作用是什么。 什么是限制性聚合酶链式反应及其在基因 诊断中的应用 第一节 聚合酶链式反应 【掌握】 PCR 反应的概念和原理， PCR 反应体系的组成成分。 第二节 以 PCR 为基础的相关技术 【掌握】逆转录 PCR 原理和方法。 第三节 PCR 产物的检测 【掌握】限制性片段长度多态性，单链构象多态性。 第四节 PCR 技术在分子诊断中的应用 【了解】 PCR 技术在临床医学中的应用。 思考题： 一、名词解释： PCR、 RTPCR 二、问答题： PCR 的基本原理是什么。 PCR 反应体系中基本的反应成分有哪些。 PCR 产物的检测方法有哪 些。 第九章。