细胞培养

菌。 青霉素是 80 万单位 /瓶，用注射器加 4ml 灭菌双蒸水。 链霉素是 100 万单位 /瓶，加 5ml 灭菌双蒸水，即每毫升各为 20万单位。 ，使青链霉素的浓度最终为 100 单位 /ml。 1 单位＝ 1 微克。 五 .RPMI1640 的制备与消毒： 、调 PH 值、定容：先将培养基粉剂加入培养液体积 2/3 的双蒸水中 ,并用双蒸水冲洗包装袋 23 次 (冲洗液一并加入培养基中

数板上盖玻片的一侧加该细胞悬液，加样量不要溢出盖玻片，也不要过少或带气泡。 计算细胞浓度。 用 RPMI1640 制备成 1 106/ml 浓度的细胞悬液，并按 10％的量加入小牛血清。 将上述细胞悬液分装 5ml 到新细胞瓶中，塞好塞子，标记后送培养箱培养， 9 24h 后观察。 五、实验结果 显微镜下观察 Hep2 细胞生长良好，已长满单层，细胞呈不规则多边形，透光性良好。 实验五 VSV

、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清 还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加 10%～ 20%的血清。 （我国动物细胞培养小牛血清的来源是国外进口。 原因是国内生产的不能彻底消灭支原体） 师：动物细胞培养时，所需要温度和 pH分别是多少。 为什么要保证适宜的温度和 pH。

法。

室管理员按照细胞株保存程序进行细胞株的液氮保存和登记，登记时应注明细胞株的来源、物种、细胞传代数、特殊培养基或特殊冻存液、细胞特性等；所保存的细胞由细胞培养室管理员按照细胞株保存程序进行定期复苏（每 2 年一次）；实验者所需细胞株由细胞培养室管理员复苏后登记、发给。 细胞培养室专用拖鞋及无菌衣的使用和更换 进入细胞培养室必须更换成拖鞋或带鞋套；进细胞培养 室必须穿无菌衣、带无菌帽和口罩