xx新编8-湖南省20xx年钩端螺旋体病监测实施方案

xx新编8-湖南省20xx年钩端螺旋体病监测实施方案内容摘要：

GMT 30～ 阳性数 GMT 40～ 阳性数 GMT 50～ 阳性数 GMT 合计 阳性数 GMT 填表时间： ______年 ___月 ___日 填表人： _________________ 单位 (盖章 )： ___________________________________ 17 附件 1： 显微镜凝集试验 (MAT) 1．抗原的选择和制备 将我国 15群 15型钩端螺旋体代表株于 Korthof培养基中， 28℃ 培养 5～ 7天，暗视野显微镜检查，每 400 倍暗视野下不少于 50 条，运动活泼并无自凝者可作显 凝抗原。 2．操作方法 血清 56℃ 水浴灭活 30 分后，用生理盐水稀释，健康人以 1∶ 早期病人以 1∶ 50、恢复期病人以 1∶ 100 开始，做倍比稀释。 取 15 个代表株的培养液依次加入倍比的稀释血清孔。 摇匀后 37℃ 孵育 ～ 2h。 用接种环挑取反应液及对照，放置载物玻片上暗视野显微镜下观察凝集情况，测定其凝集滴度。 凝集滴度按原血清稀释倍数 2 计算。 3．终点凝集滴度的判定 以出现＋＋凝集 (即视野中 50%钩体凝集 )的血清最高稀释度作为终点凝集滴度。 18 附件 2： 间接酶联免疫吸附试验 (间接 ELISA) 1．操 作步骤： 血清用 PBS 稀释液按 1:400、 1:800、 1:1600、 1:3200 稀释。 取包被钩体抗原的酶标板，将稀释好的阳性血清、阴性血清及样本血清分别加入酶标板孔中，每孔 100μl，同时加入 2 孔空白对照 (PBS)。 37℃ 60 分钟，弃去孔中液体。 洗板，于酶标板每孔加入洗涤液 250μl，洗板 3 次。 每支酶标羊抗人 IgG 用 三蒸水充分溶解均匀后，再用 PBS 按 1:50 稀释，每孔加稀释好的酶结合物 100μl。 放置 37℃ 40 分钟。 洗板：洗板 4 次 (方 法同 )。 显色与终止：加底物液 A、底物液 B 各 1 滴。 室温避光显色， 10 分钟后，每孔加终止液 1 滴，终止反应。 采用波长 405nm的酶标仪测定 OD 值，阴性 OD 值 作为判定界值。 检测样本的 OD 值 ≥此判定界值则为阳性。 2．试剂配制： 2． 1 洗涤液 (PBST， )： NaCl KH2PO4 KCl Tween 20 硫柳汞 D2H2O 至 1000ml 2． 2 稀释液 (PBS， ): NaCl KH2PO4 KCl 硫柳汞 19 D2H2O 至 1000ml 2． 3 底物液 A( 柠檬酸 磷酸氢二钠缓冲液， %过氧化氢脲，pH ) 柠檬酸 .H2O 过氧化氢脲 D2H2O 至 1000ml 250ml 2． 4 底物液 B( 3`、 5`─四甲基联苯胺， TMB，作用时终浓度 ) 2． 4． 1 TMB 贮存液 TMB 贮存液 (50mg/ml) TMB 150mg 二甲基亚砜 3ml 注意事项： TMB 不易溶解，缓慢加入二甲基亚砜中并不断摇晃或搅拌，水浴适当加热可加速溶解。 2． 4． 2 底物液 B 柠檬酸 .H2O EDTANa2 (EDTA) D2H2O 至 1000ml 250ml TMB 贮存液 (50mg/ml) 4ml 1ml 2． 5 终止液： 2M H2SO4 20 附件 3： 分离培养钩体方法 1 培养基制备方法 Korthof 培养基成分和制备方法 成分 蛋白胨 (可用胰蛋白胨代替 ) 400mg 氯化钠 (NaCl) 700mg 氯化钾 (KCl) 20mg 碳酸氢钠 (NaHCO3) 10mg 磷酸二氢钾 (KH2PO4) 120mg 碳酸氢二钠 (12 个结晶水 )(N2HCO3 .12H2O) 440mg 氯化钙 (CaCl2) 20mg(如高压灭菌或煮沸后出现沉淀，可省去此成分 ) 蒸馏水 500ml 制法 将以上成分溶于蒸馏水中煮沸 20min过滤，校正 pH为 ，分装于烧瓶内，每瓶 100ml， 15 磅 30min高压灭菌。 兔血清 56℃ 30min灭活。 将 液以无菌操作加入灭活兔血清最后浓度为 8～ 10%。 Tepck ии 培 养基 (磷酸盐缓冲溶液 )成分和制备方法 母液 1/15mol/L 12g/500ml 蒸馏水 磷酸缓冲液 1/15mol/L KH2PO4 取 1/15mol/L 80ml、 1/15mol/L KH2PO4 20ml，混匀，调整～ ,加入蒸馏水 900ml 混匀，分装试管，并用 15 磅 30min 高压灭菌，再以无菌操作加入灭活兔血清最后浓度为 8～ 10%。 2 培养分离病原体 病人血液培养： 采集早期病人血液，无菌操 作接种于 2～ 3 管 Korthof 培养管中，每管接种 1～3 滴。 血培养管置 28℃ 培养。 每隔 5～ 7d 取培养物暗视野显微镜下观察有无钩端螺旋体生长，若有生长，即为分离阳性。 若未见生长，需继续培养 60d，仍不见 21 钩端螺旋体方作阴性处理。 病人尿液培养： 接取病后两周以上的病人中段尿 30～ 50ml 于无菌离心管中 3500～ 4000r/min离心 1h。 取沉渣 ～ 接种于 2～ 4 管上述培养基中， 28℃ 孵育。 每隔 5～7d 取材镜检。 为提高检出率和减少污染，可在采集尿标本的前一天晚上给病人服碳酸氢钠 (NaHCO3)2～ 4g，同时，在培养基中加入 100～ 400μg/ml 5氟脲嘧啶或1/2020 的磺胺嘧啶。 动物肾脏培养： 无菌操作，采集新鲜动物肾脏 (包膜完整 )，剪取米粒大小接种于 2～ 3 管Korthof 培养管中。 置 28℃ 培养。 每隔 5～ 7d 取培养物暗视野显微镜下观察有无钩端螺旋体生长，若有生长，即为分离阳性。 若未见生长，需继续培养 60d，仍不见钩端螺旋体方作阴性处理。 3． 菌株分群、分型： 应用分群血清与新分离的钩端螺旋体作凝集试验，确定菌群。 应用交叉凝集素吸收试验或分型因子血清来确定菌型。 范文最新推荐 22 电力安全月工作总 结 [电力安全月工作总结 ]电力安全月工作总结 2020 年 3 月 1 日至 3 月31 日为我公司的安全生产月， **变电站围绕。 夯实基储提高素质、树立标杆、争创一流。 的主题，开展了丰富多彩、形式多样的具体行动：通过看板形式宣传安全第一、预防为主的方针；通过 48+4 的学习机会，进行安全生产大讨论；通过安全活动进行查找本站的隐患的活动，电力安全月工作总结。 形成了。 人人学会安全，层层尽责保证安全。 的良好氛围，使我站的安全生产工作又上了一个新的台阶。 本站安全生产月活动具体工作如下： ，大家坐在一 起讨论活动的主题、学习实施纲要、讨论各个实施阶段的活动安排。 深刻反思 事故，汲取事故教训，每人写了一份 事故反思，并对本站的安全管理、记录报表、规章制度、培训工作、事故隐患每个值班员都谈了自己的看法和建议，对站内管理每个人都倾注了最大的热情，可见 对每一个值班员的触动是刻骨铭心的，安全月的必要开展对变电站各项工作的促进，尤其对值班员安全意识、主人翁精神的影响最为深刻。 在安全生产整顿周活动的基础上，结合秋季安全大检查，进一步查摆了本站安全生产的隐患，特别是各种规章制度的建立、健全、完善和执行情况，对现场运行规程从全面、具体和针对性上进行了修订；制定全站停电的反事故预案，制定低温天气和防冰闪的反事故措施，进行现场演练。 当前正处年底收范文最新推荐 23 关和人员调整后的敏感时期，人员思想浮动大，而且本站正在进行新母差与新间隔投运的准备工作，施工人员多，施工人员安全意识和安全防范技能较低，是近阶段我站安全运行的一大隐患，我们会同工作负责人一起讨论施工过程中的存在和潜在的危害，并有针对性地制定防范了措施，保证了施工安全的进行。 针对人员素质参差不起，安全意识高低不同，我们制定了《 **站 考核细则》，制定措施 , 明确职责和工作程序，对任何可能发生的情况做了充分的准备工作。 班的时间，我们查找本站存在的隐患，实行分片分区，责任到人，对查找到的隐患汇总分析，能自己解决的我们都及时认真地消除，对我站能力不足不能解决的，我们纳入工区的职业安全健康体系，由工区负责解决，工作总结《电力安全月工作总结》。 该报缺陷的上报缺陷，该报危害辨识的报危害辨识，使站内所有设备、所有工作、所有危险点在控、可控、能控。 、操作等，我们编制事故预案，如 220KV母差保护更换的准备 工作和悬垂刷涂工作， 除了工区安排跟踪外，站内根据人员新调整、新人员对设备不熟悉的现状，三班改为两班，加强值班力量， 保证了各项工作的顺利完成。 为防止意外发生，我们共同讨论制定出了在工作期间母线故障的反事故预案。 在哪些差距，现有规程制度能否满足现场规范化、标准化工作需要，并在站内宣读并实施了《 **站考核细则》，按照个人能力分为 12 大员管理站内事务，规定每个值班员必须按照规章制度工作，否则就严格范文最新推荐 24 考核。 在个人专业技能与岗位要求存在的差距，站内按人所 需制订培训计划，建立心智加油站和个人提升计划的培训平台进行培训。 工作日志、检修记录、安全活动、安全用具记录、缺陷记录等班组记录已经和工区进行交流，完善纪录格式。 《电力安全工作规程》、本岗位安全职责、工作中的危险点辨识和防范措施及相关专业的规程制度等的培训，选派两名值班员参加工区举办的安规比赛，锻炼值班员具备工作所要求的安全生产技能，熟知各项工作的危险点及防范措施； ，针对本站实际按照运行工区职业安全健康管理体系实施。 三票。 管理制度，内容完善；。 三票。 按照规定 执行，严格执行倒闸操作。 六关。 制度（操作准备关、接令关、操作票填写关、核对图板关、操作监护关、质量检查关）；。 三票。 的填写及执行情况良好。 三票。 管理制度健全，制定了。 三票。 合格评价标准和考核规定；。 三票。 合格评价符合标准要求，对发现的问题能及时提出改进措施，有记录可查；定期对。 三票。 的执行情况进行统计、分析和考评。 《沧州供电公司运行管理标准》及运行相关管理规定。 完善我站的《综自站的管理规定》，并制定措施严格执行。 查找五防系统管理和软。