吸光

660 nm （二） 化学因素 ； —有色物离解、 缔合 ....... 18 第三节 吸光光度法及仪器 一、目视法 c4 c3 c2 c1 c1 c2 c3 c4 ：简单、可测微量，复合光，误差大。 观察方向 观察方向 ： 19 二、 光电比色法 通过滤光片得一窄范围的光 (几十 nm) 光电比色计结构示意图 ： （ 滤光片获取单色光 ） A C ：准确度较高（消除人眼的主观因素）

260 280 实验步骤 • 改良 Lowry法 编 号 1 2 3 4 5 6 测定管 蛋白含量 ug/ml 35 70 105 140 0 未知 标准溶液、样品 ml 生理盐水 ml 试剂 A ml 混匀后置于 50度水浴中保温 10分钟，冷却 室温放置 10分钟 立即混匀，置于 50度水浴中保温 10分钟，冷却后在 650nm处比色 试剂 B

00 nm 蓝敏管 200625 nm Ni环（片） 碱金属 光敏阴极 h 32 光电倍增管 待扫描 160700 nm 1个光电子可产生 106～ 107个电子 33 分光光度计的类型 34 多通道仪器 （ Multichannel Instruments） 光电二极管阵列 (通常具有 316个硅二极管 ) photodiode arrays (PDAs) 同时测量 200～

] ( H L )=++ [ H ] + [ H ]Ka＝ [H+][L]/[HL] 高酸度下，几乎全部以 HL存在，可测得 AHL＝ εHLc(HL)； 低酸度下，几乎全部以 L存在，可测得 AL ＝ εLc(HL). 代入整理： AAKA A +HLa L= [ H ][HL] [L] L HLAAK AAap = p H + l g 或 配制一系列 c相同 ,pH不同的溶液 ,测 A.