几丁质对海洋生防酵母(rhodosporidium_paludigenum)抑菌活性的影响及相关机理的研究毕业论文(编辑修改稿)

几丁质对海洋生防酵母(rhodosporidium_paludigenum)抑菌活性的影响及相关机理的研究毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

和 PAL 活性 刺激果实 1， 3葡聚糖酶基因表达 表 13 主要产抗生素菌株 抗生素名称 产生菌株 作用对象 病原菌 伊枯草菌素 枯草芽孢杆菌 B3 核果类水果 M. fructicola 吡咯菌素 洋葱假单胞菌 (P. cepacia) LT412W 梨果 、柑橘 核果类水果 扩展青霉、灰葡萄 孢 丁香霉素 E 丁香假单胞杆菌 ESC10 和 ESC11（ BioSave） 柠檬 吡喃酮 木霉 草莓、苹果 灰葡萄孢 拮抗菌生理调控及机理的研究 近年来，随着拮抗菌和病原菌之间 的 细胞学、生物化学和分子生物学研究的不断深入发展，研究者发现 通过调节采后拮抗酵母的生理代谢机制可能是增强其拮抗能力的有效途径之一（ Janisiewicz 和 Korsten, 20xx）。 逆境培养 Teixid243。 等（ 1998）研究表明通过低水分活度培养 Candida sake 后其在采哈尔滨工业大学 工学 学士学位论文 第一章 文献综述 5 前使用时生长数量明显增加并增强了酵母的拮抗效力，其机理与积累糖醇和海藻糖有关； „„。 拮抗 物质的 分泌 和 积累 阿 根 廷学 者发 现粘 红酵 母（ Rhodotorula glutini) 产 生 的一 种 酸（ rhodotorulic acid）能抑制许多病原真菌，而且发现整合使用 rhodotorulic acid 和该粘红酵母能增强其对果实病害的控制（ Calvente et al., 20xx； Sansone et al., 20xx）。 „„ 基因工程技术 的应用 利用分子生物学和基因工程的 手段研究拮抗菌的遗传背景并开展相应分子水平的改造是生物防治领域的一个研究热点， „„。 本课题研究目的 近年来，采后生物保鲜剂的发展遇到了瓶颈。 „„。 本试验目的是解决瓶颈问题之一，探讨通过在培养基中添加几丁质等培养酵母 R. paludigenum 提高其拮抗效力的可行性，以提高酵母的生防效果。 研究几丁质诱导后 R. paludigenum 对苹果、梨采后主要真菌病害扩展青霉（ P. expansum）体内的抑制效果，筛选出最佳诱导剂量及诱导时间，并结合其他诱导因子为苹果、梨采后病害提供一种安全、经济有效的防 治方法， 并对可能存在的相关机理，包括促进酵母菌生长、分泌抗菌物质和诱导抗性等进行系统研究。 应用前景和学术价值 利用拮抗酵母对水果采后病害进行生物防治是目前国内外研究的热点，其 对于保护生态环境、减少食品农药残留、保障公众健康具有重要意义。 但是要实现拮抗酵母的商业化推广应用，迫切需要解决的问题是提高其生物学效力。 „„。 章节间要有分页符哈尔滨工业大学学士学位论文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 6 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 前言 生物防治是采用微生物菌株或抗菌素类物质，通过喷洒或浸渍果实处理，以降低或防 治果实采后病害的保鲜方法。 „„。 材料和方法 主要仪器 TH3560 全自动灭菌锅 造鑫 (TSAO HSIN)企业有限公司 SWCJ1F 超净工作台 苏州安泰空气技术有限公司 SIGMA 3K15 离心机 德国希格玛（ SIGMA）公司 QYC211 全温空气摇床 上海福玛实验设备有限公司 Sartrious 电子天平 北京赛多利斯天平有限公司 200 l、 1000 l、 5ml移液器 德国 Eppendorf 公司 血球计数板（ 2516） 上海医用光学仪器厂 光学显微镜 日本奥林巴斯有限公司 LRH250 生化培养箱 上海一恒科技有限公司 拮抗菌及其培养 拮抗菌 Rhodosporidium paludigenum，分离自中国东海近海海域，并经英国国际微生物所菌种保存和鉴定中心（ CABI Bioscience Identification Services）鉴定。 „„ 酵母诱导培养 保存的酵母菌种首先在 NYDA 斜面培养基中进行活化， „„。 哈尔滨工业大学学士学位论文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 7 病原菌培养和孢子悬浮液的制备 病原菌 病原菌为扩展青霉（ Penicillium expansum）， „„。 病原菌菌悬液的制备 从病原菌保存斜面中 挑取适量的霉菌孢子， „„。 试剂 几丁质（ Chitin）为生化纯试剂，使用前先研磨，并用 100 目筛网过滤后备用。 果实选择与预处理 试验所用果实为正常商业成熟度的苹果 (Malus domestica)果实， „„。 几丁质对 R. paludigenum 生防效果的影响 不同浓度几丁质对拮抗酵母生防活性的影响 酵母活化和液体培养、菌体收集同 ， „„。 几丁质诱导后不同浓度 R. paludigenum 酵母的生防效果 用消过毒的打孔器在每个果实表面形成统一大小和深度的伤口。 „„。 不同培养时间对几丁质诱导 拮抗酵母生防活性的影响 酵母活化和液体培养、菌体收集同 ， „„。 几丁质与 NaCl 结合诱导对拮抗酵母生防活性的影响 酵母活化和液体培养、菌体收集同 ， „„。 数据处理 分析与作图 采用 SPSS 软件 (Statistical Product and Service Solutions)进行数据统计，数据采用 ANOVA 进行邓肯氏 差异分析方法（取 p）。 采用 软件作图。 哈尔滨工业大学学士学位论文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 8 结果 不同浓度几丁质对 R. paludigenum 生防效力的影响 在不同浓度的 NYCB 中诱导培养后， R. paludigenum 对梨青霉病的生防效力显著提高（图 21 和图 22）。 „„。 6d 7d020406080100cbcbcdbcdbcdbccbaDisease incidence (%)D ay s af t er i nocul at i on(d) C ont rol N Y D B N Y C B ( 0. 1%) N Y C B ( 0. 2%) N Y C B ( 1. 0%) N Y C B ( 2. 0%)a 图 21 不同浓度几丁质培养后的 R. paludigenum 对梨青霉病的抑制效果 温表 注：线条代表 3 个重复的标准误，不同的字母表示 Duncan 多重测试得出的差异显著性 Fig. 21 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on pears inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. Notes: Bars represent standard errors of three replications. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。 s multiple range tests. 能用图表示的结果最好用图，不要用表格，数据尽量作统计学分析 能用图表示的结果最好用图，不要用表格，数据尽量作统计学分析 图题五号字，加粗，居中排列，中文英对照一致，图注字体为小五号 哈尔滨工业大学学士学位论文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 9 6d 7d012345cbcabaababababLesion diameter (mm)D ay s af t er i nocul at i on(d) N Y D B N Y C B ( 0. 1%) N Y C B ( 0. 2%) N Y C B ( 1. 0%) N Y C B ( 2. 0%) a 图 22 不同浓度几丁质培养后 R. paludigenum 对梨青霉病病斑直径的影响 Fig. 22 Severity of blue mold decay caused by Penicillium expansum on pears inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. Bars represent standard errors of three replications. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。 s multiple range tests. 类似的，在苹果果实上， „„。 C ont rol A B C D E020406080100bcccbbDIsease incidence (%)T reat m enta C ont A B C D E048121620bbbbbLesion diameter (mm)T reat m enta 图 23 不同浓度几丁质培养后 第 5 天 R. paludigenum 对苹果青霉病的生防效果 注： A: NYDB 培养的 R. paludigenum。 B: %（ w/v）几丁质 NYDB 培养的 R. paludigenum。 C: %（ w/v）几丁质 NYDB 培养的 R. paludigenum。 D: %（ w/v）几丁质 NYDB 培养的 R. paludigenum。 E: %（ w/v）几丁质 NYDB 培养的 R. paludigenum. Fig. 23 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. 哈尔滨工业大学学士学位论文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 10 Notes: A: R. paludigenum cultured in NYDB。 B: R. paludigenum cultured in NYDB with % chitin。 C: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin。 D: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin。 E: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin. Bars represent standard errors of three replications. 几丁质诱导后不同浓度 R. paludigenum 酵母的生防效果 实 验结果表明， „„。 不同培养时间对几丁质诱导 R. paludigenum 生防效力的影响 %（ w/v） 的 NYCB 培养基分别培养 2 3 4 72 和 96 h 后， „„。 几丁质与 NaCl 结合诱导对 R. paludigenum 生防效力的影响 几丁质与 NaCl结合诱导后， R. paludigenum 对梨青霉病的抑制效果 „„ 哈尔滨工业大学学士学位论文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制效果研究 11 讨论 试验结果表明： „„。 哈尔滨工业大学学士学位论文 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 对果实采后真菌病害抑制机理研究 12 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 对。