常见食品检验检测项目作业指导书

常见食品检验检测项目作业指导书内容摘要：

肪。 因为提取物中除脂肪外，还含有色素、蜡、树脂、游离脂肪酸等物质。 三、仪器与试剂 ① 索氏抽提器 ② 电热恒温鼓风干燥箱 ① 无水乙醚或石油醚（沸程 30～ 60℃ ）； ② 石英砂 ：粒度 ～ ，二氧化硅的质量分数不低于 99%。 ③ 滤纸筒 四、实验步骤 1．滤纸筒的制备 将滤纸剪成长方形 815cm ，卷成圆筒，直径为 6cm，将圆筒底部封好，最好放一些脱脂棉，避免向外漏样。 2．索式抽提器的准备 索氏抽提器由三部分组成，回流冷凝管、提取筒、提脂瓶组成。 提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重，其它要干燥。 3．精确称取烘干磨细的样品 2～ 5g（精确到 ） ，放入已称重的滤纸筒（半固体或液体样品取 5～ 10g（精确到 ） 于蒸发皿中，加 20g 海砂，在水浴上蒸干，再于 100177。 5℃ 烘干 ，研细，全部移入滤纸筒内，蒸发皿及附有样品的玻璃14 棒用蘸有乙醚的棉花擦净，棉花也放入滤纸筒内），封好上口。 4．抽提 将装好样的滤纸筒放入抽提筒，连接已恒重的脂肪烧瓶，从提取器冷凝管上端加入乙醚，加入的量为提取瓶体积的 2/3。 接上冷凝装置，在恒温水浴中抽提，水浴温度大约为 55℃ 左右，一般样品抽提 610 小时，坚果样品提取约 16 小时。 提取结束时可用滤纸检验，接取 1 滴抽提液，无油斑即表明提取完毕。 5．回收乙醚 取下脂肪瓶，回收乙醚。 待烧瓶内乙醚剩下 1～ 2 mL 时，在水浴上蒸干，再于 100150℃ 烘箱烘至恒重，记录重量。 五 、结果计算 式中： m2——接受瓶和脂肪的质量， g m1——接受瓶的质量， g； m ——样品的质量， g。 六、注意事项与说明 1．索氏提取法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不宜吸湿结块的样品的测定。 此法只能测定游离态脂肪，结合态脂肪需在一定条件下水解转变成游离态的脂肪方能测出。 2．样品含水分会影响溶剂提取效果，而且溶剂会吸收样品中的水分造成非脂成分溶出。 装 样品的滤纸筒要严密，不能往外漏样品，也不要包得太紧影响溶剂渗透。 放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管，否则样品中的脂肪不能提尽，造成误差。 3．对含多量糖及糊精的样品，要先以冷水使糖及糊精溶解，经过滤除去，将残渣连同滤纸一起烘干，再一起放入提提管中。 4．抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。 5．提取时水浴温度不可过高，以每分钟从冷凝管滴下 80 滴左右，每小时回流 6—12 次为宜，提取过程应注意防火。 6．抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管。 这样， 可防止空气中水分进入，也可避免乙醚挥发在空气中，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。 15 7．提取是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，由抽提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下油迹表明已抽提完全，若留下油迹说明抽提不完全。 8．在挥发乙醚或石油醚时，切忌用直接火加热，应该用电热套，电水浴等。 烘前应驱除全部残余的乙醚，因乙醚稍有残留，放入烘箱时，有发生爆炸的危险。 9．反复加热会因脂类氧化而增重。 重量增加时，以增重前的重量作为恒重。 10．索氏提取法对大多数样品结果比较可靠，但需 要周期长，溶剂量大。 16 还原糖的测定 （直接滴定法） 一、实验目的 1．了解费林试剂热滴定测定 还原糖 的原理。 2．能够准确 测定果蔬中还原糖 的含量。 二、实验原理 还原糖是指含有自由醛基或酮基的单糖和某些二糖。 在碱性溶液中，还原糖将 Cu2+、 Hg2+、 Fe3+、 Ag+等金属离子还原，而糖本身被氧化和降解。 费林试剂是氧化剂，由甲、乙两种溶液组成。 甲液含硫酸铜和亚甲基蓝（氧化还原指示剂）；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。 将一定量的甲液和乙液等体积混合，生成可溶性的络合物酒石酸钾钠铜；在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜沉淀再与试剂中的亚铁氰化钾反应生成可溶性无色化合物，便于观察滴定终点。 滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。 亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，即达滴定终点。 根据消耗样液量可计算出还原糖含量。 三、试剂 1．碱性酒石酸铜甲液：称取 15g 硫酸铜 ()及 次甲基蓝，溶于水中并稀释到 1000ml。 2．碱性酒石酸铜乙液：称取 50g 酒石酸 钾钠及 75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至 1000ml，贮存于橡皮塞玻璃瓶中。 3．乙酸锌溶液：称取 乙酸锌，加 3ml 冰醋酸，加水溶解并稀释到 100ml。 4． ％亚铁氰化钾溶液：称 亚铁氰化钾溶于水并稀释至 100ml。 5．葡萄糖标准溶液：准确称取 经过 98—100℃ 干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后加入 5ml 盐酸 (防止微生物生长），移入 1000ml 容量瓶中，用水稀释到 l000ml。 6. 1 mol/L NaOH 标准溶液。 7． 15%Na2CO3 溶液：称 15g 碳酸钠溶于水并稀释至 100ml。 17 8． 10%Pb(Ac)2 溶液：称 10g 醋酸铅溶于水并稀释至 100ml。 9． 10%Na2SO4 溶液：称 10g 硫酸钠溶于水并稀释至 100ml。 四、试验步骤 1．样品处理 ① 含淀粉的食品：称取粉碎或混匀后的试样 10g～ 20g(精确至 )，置250mL 容量瓶中，加水 200mL，在 45℃ 水浴中加热 1h，并时时振摇，冷却后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。 吸取 上清液置于另一 250mL 容量瓶中，缓慢加入乙酸锌溶液 5mL 和亚铁氰化钾溶液 5mL，加水至刻度，混匀，静置 30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取后续滤液备用。 ② 酒精饮料：称取混匀后的试样 100g(精确至 )，置于蒸发皿中，用氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的 1/4 后，移入 250mL 容量瓶中，缓慢加入乙酸锌溶液 5mL 和亚铁氰化钾溶液 5mL，加水至刻度，混匀，静置 30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取后续滤液备用。 ③ 碳酸饮料：称取混匀后的试样 100g(精确至 ) 于蒸发皿中，在水浴上微热搅拌除去二氧化碳后，移入 250mL 容量瓶中，用水洗涤蒸发皿， 洗液并入容量瓶，加水至刻度，混匀后备用。 ④ 其他食品：称取粉碎后的固体试样 ～ 5g(精确至 )或混匀后的液体试样 5g～ 25g(精确至 ) ，置 250mL 容量瓶中，加 50mL 水，缓慢加入乙酸锌溶液 5mL 和亚铁氰化钾溶液 5mL，加水至刻度，混匀，静置 30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取后续滤液备用。 2. 碱性酒石酸铜溶液的标定 吸取碱性酒石酸铜甲液 和碱性酒石酸铜乙液 ，于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒～ 4 粒，从滴定管中加葡萄糖约 9mL，控 制在 2min 中内加热至沸，趁热以每 2 秒 1 滴的速度继续滴加葡萄糖，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖的总体积，同时平行操作 3 份，取其平均值，计算每 10mL(碱性酒石酸甲、乙液各 5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量 (mg)。 3. 试样溶液预测 吸取碱性酒石酸铜甲液 和碱性酒石酸铜乙液 于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒～ 4 粒，控制在 2min 内加热至沸，保持沸18 腾以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以 1 滴 /2s 的速度滴定，直至溶 液蓝色刚好褪去为终点，记录样品溶液消耗体积。 4. 试样溶液测定 吸取碱性酒石酸铜甲液 和碱性酒石酸铜乙液 ，置于 150mL锥形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒～ 4 粒，从滴定管滴加比预测体积少1mL 的试样溶液至锥形瓶中，控制在 2min 内加热至沸，保持沸腾继续以 1 滴/2s 的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积 (V)。 五、结果计算 式中： X — 试样中还原糖的含量 (以某种还原糖计 )，单位为克每百克 (g/100g)； m1 — 碱性酒石酸铜 溶液 (甲、乙液各半 )相当于某种还原糖的质量，单位为毫克(mg)； m — 试样质量，单位为克 (g)； F — 系数，对 、 、 为 1； 为 ； V — 测定时平均消耗试样溶液体积，单位为毫升 (mL) ； 250 — 定容体积，单位毫升 (mL)； 六、注意事项 1．费林试剂甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。 2．滴定必须是在沸腾条件下进行，保持反应液沸腾可防止空气进入，也可加快还原糖与 Cu2＋ 的 反应速度； 3．滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。 19 总糖的测定 一、实验目的 掌握直接滴定法测定总糖的原理和方法。 二、实验原理 样品经处理除去蛋白质等杂质后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖，以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。 三、试剂 1． 6mo1/mL 盐酸溶液 2． 甲基红乙醇溶液：称取 甲基红，用 60%乙醇溶解并定容至 100ml。 3． 20%氢氧化钠溶液。 4． %转化糖标准溶液：称取 10539。 C 烘干至恒重的纯蔗糖 ，用水溶解并移入 1000m1 容量瓶中，定容，混匀。 取 50m1 于 100m1 容量瓶中，加 6mol/L盐酸 5m1，在 68～ 70℃ 水浴中加热 15min，取出于流动水下迅速冷却，加甲基红指示剂 2 滴，用 20%NaOH 溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。 此溶液每毫升含转化糖 lmg。 5．费林氏 A 液：称取 15g (CuS045H2O）及 次甲基蓝，溶于水并稀释到 1L。 6．费林氏 B 液：称取 50g 酒石酸钾钠及 75g 氢氧化钠，溶于水，再加入 4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至 1L， 贮存于橡皮塞玻璃瓶中。 7．乙酸锌溶液：称取 乙酸锌（ Zn（ CH3COO） 22H2O），加 3m1 冰醋酸，加水溶解并稀释至 1 00ml。 8． %亚铁氰化钾溶液：称取 亚铁氰化钾 [K4Fe（ CN） 63H2O]，溶于水，稀释至 100m1。 四、实验步骤 取适量样品，移入 250m1 容量瓶中，慢慢加入 5m1 乙酸锌溶液和 5m1 亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，摇匀后静置 30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收20 集滤液备用。 吸取处理后的样液 50mL 于 l00mL 容量瓶中，加入 5mL6mol/L 盐酸溶液，置68～ 70℃ 水浴中加热 15min，取出后迅速冷却，加甲基红指示剂 2 滴，用 20%NaOH溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。 准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各 5mL，置于 250mL 锥形瓶中，加水 l 0mL，玻璃珠 3 粒。 从滴定管滴加约 9m1 转化糖标准溶液，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾 30s，趁热以每 2 秒 1 滴的速度继续滴加转化糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。 记录消耗转化糖标准溶液的总体积。 平行操作 3 次，取其平均值，按下式计算。 F＝ CV 式中： F— I0ml碱性酒石酸铜溶液相当于转化糖的质量， mg； C—转化糖标准溶液的浓度， mg/ml； V—标定时消耗转化糖标准溶液的总体积， ml。 3．样品溶液预测 准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各 5m1，置于 250m1 锥形瓶中，加水 l0ml，玻璃珠 3 粒，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾 30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态，待溶液兰色变浅时，以每 2 秒 1 滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。 记录样品溶液消耗的体积。 4．样品溶液测 定 准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各 5ml，置于 250m1 锥形瓶中，加水 l0ml，加玻璃珠 3 粒，从滴定管滴加入比预测时样品溶液消耗总体积少 lml 的样品溶液，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾 30s，趁热以每 2 秒 1 滴的速度继续滴加样液，直至蓝色刚好褪去为终点。 记录消耗样品溶液的总体积。 同法平行操作 3 次，取平均值。 五、结果计算 1001 0 0 0100VV50mF%21）＝总糖（以转化糖计， 21 式中： F— I0ml碱性酒石酸铜溶液相当于转化糖的质量， mg； V1—样品处理液总体积， ml； V2—。