单核增生李斯特氏菌检测概述

单核增生李斯特氏菌检测概述内容摘要：

/L UVM • UVM只有选择性没有区别性 • 加入 萘啶酮酸 和 盐酸吖啶黄 ，作为选择性因子。 虽然其中含有七叶灵，但是没有添加柠檬酸铁铵，不能发生黑色的颜色反应。 LEB和 BLEB • 只有选择性没有区别性 • LEB是在 TSBYE的基础上加入 盐酸吖啶黄 、萘啶酮酸 和 放线菌酮 等选择性因子；加入的 丙酮酸钠 ，有助于受损细胞的恢复；不含七叶灵和柠檬酸铁铵，无颜色反应 • BLEB是在 LEB基础上加入缓冲体系：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠 检测程序 分离 • 分离培养基有： OXA、 PALCOM、 LPM、 MOX等，但首选仍然是 OXA。 分离原理主要是基于李斯特氏菌具有 β－ D－葡萄糖苷酶 的活性，能水解培养基中的七叶灵，产生七叶苷，与铁离子产生颜色反应而，使菌落为棕褐色，并带有褐色晕圈，而致病性和非致病性李斯特氏菌病都能发生这种反应 •还有一些选择性显色培养基，如 BCM、 ALOA、CHROMagar listeria、 Rapid’L. mono等，其原理主要是检测由毒力基因编码的 溶血素 ，而此种溶血素只存在于单核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌中，因而可以很好的将此两种菌同李斯特属的其他种分开。 OXA平板 单核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 48h， 35℃ 培养 OXA平板 无害李斯特氏菌ATCC 33090 48h， 35℃ 培养 检测程序 鉴定 • 蓝色菌落检验（ Henry illumination） • 典型运动：相差显微镜，轻微旋转或翻跟头 动力试验： 7天，伞形生长 • 过氧化氢酶 试验：阳性 • 革兰氏染色 ：阳性短杆菌 • 溶血试验 ：穿刺接种血平板 • 硝酸盐还原试验： 5天，阴性 • 糖发酵试验 ：葡萄糖、麦芽糖和七叶灵，李斯特菌属反应均为阳性，除格氏李斯特甘露醇阴性，李斯特其他种甘露醇阴性， 木糖 和 鼠李糖 最有检测意义 动力试验 血平板 单核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 36h， 35℃ 培养 血平板 无害李斯特氏菌 ATCC 33090 36h， 35℃ 培养 血平板 伊氏李斯特氏菌 ATCC 19119 24h， 35℃ 培养 单核增生李斯特氏菌检测流程 25g样品 +225ml BLEB基础（加入丙酮酸钠） 加入萘啶酮酸、盐酸吖锭黄、放线菌酮 30℃ 4hr 划线接种 OXA平板 30℃ 24hr和 48hr 科玛嘉李氏菌显色培养基 TSAYE分纯 35℃ 24hr48hr 35℃ 24hr 过氧化氢酶试验、革兰氏染色、溶血试验、糖发酵试验（木糖、鼠李糖） API Listeria 35℃ 2448hr 报告结果 35℃ 1824hr 方法名称 一次增菌 二次增菌 分离 鉴定 快速方法 SN 0184 1993 加工 MBP 30℃ ， 1824h EB 30℃ ， 24/48h MMA/ OXA （ 35℃ ， 2448h） 蓝色菌落；典型运动；过氧化氢酶；革兰氏染色；溶血试验；尿素酶试验；硝酸盐还原； MRVP；三糖铁；糖发酵；动力试验；协同溶血 *；血清学检验 *；小鼠毒力试验 * 无 未加工 EB （ 30℃ ， 24/48h） GB/T 2020 EB （ 30177。 1℃ ， 48h） MMA （ 30177。 1℃ ， 2448h） 蓝色菌落；三糖铁；动力试验；染色镜检（革兰氏染色、典型运动）；生化特性（溶血反应、硝酸盐还原、尿素酶、 MRVP、糖发酵）；小鼠毒力试验；协同溶血 无 LB1 （ 30177。 1℃ ，24h） LB2 （ 30177。 1℃ ，24h） FDA BLEB+Phy （ 30℃ ， 4h） BLEB+Phy+三种抑菌剂 （ 30℃ ，20/44h） O。