1什么是感受态？细菌处于0℃，01mcacl2低渗溶液中，使菌细胞膨胀成(编辑修改稿)

1什么是感受态？细菌处于0℃，01mcacl2低渗溶液中，使菌细胞膨胀成(编辑修改稿)内容摘要：

性迅速而准确，而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状结构，通过离心，染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA，蛋白质 SDS 复合 物等一起沉淀下来而被除去。 有几种 构型 ，转化率如何。 细菌质粒 DNA 有可以相互转化的 3 种不同构型，即线状、环状、超螺旋。 微生物常常通过质粒倡导从而在自然条件下发生基因重组，常见的方式有：接合、传导、转化。 超螺旋转化率最高。 11. 加入溶液Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的目的和作用。 碱裂解法提取质粒 DNA 的基本原理是溶液 I 使细胞悬浮，并且 EDTA 可以与 Ca2+和 Mg2+螯合，抑制 DNase 的活性；溶液 II 裂解细菌，变性蛋白质和少量质粒；溶液 III 使大部分蛋白质与细菌基因组 DNA 一起被共沉淀，质粒 DNA 复性。 限制性内切酶可特异地结合于一段被称为限制酶识别序列的 DNA序列位点上并在此切割双链 DNA。 绝大多数限制性内切酶识别长度为 5 或 6 个核苷酸且呈二重对称的特异序列，切割位点相对于二重对称轴的位置因酶而异。 一些酶恰在对称轴处同时切割 DNA 双链而产生带平端的 DNA 片段，另一些酶则在对称轴两侧相对的位置上分别切断两条链，产生带有单链突出端（即粘端）的 DNA 片段。 13. 影响酶切效果的主要因素 （ 1） 内切酶 （ 2） ＤＮＡ （ 3） 反应缓冲液 （ 4） 酶解温度与时间 （ 1） 浓缩的 限制性内切酶可在使用前以 1限制酶缓冲液稀释，切勿用水稀释以免酶变性。 （ 2） 购买的限制性内切酶多保存于 50%甘油中，于 20℃ 是稳定的。 进行酶切消化时，将除酶以外的所有反应成分加入后即混匀，再从 20℃ 冰箱中取出酶，立即放置于冰上。 每次取酶时都应更换一个无菌吸头，以免酶被污染。 加酶的操作尽可能快，用完后立即将酶放回20℃ 冰箱。 （ 3） 尽量减少反应体积，但要确保酶体积不超过反应总体积的 10%，否则酶活性将受到甘油的抑制。 （ 4） 通常延长时间可使所需的酶量减少，在切割大量 DNA 时可用。 在消化过程中可取少量反 应液进行微量凝胶电泳以检测消化进程。 （ 5） 注意星号酶切活力。 DNA的基本原理 琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解， 45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定于 琼脂糖的浓度。 DNA 分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。 DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。 不同 DNA，其分子量大小及构型不同，电泳时的泳动率就不同，从而分出不同的区带。 琼脂糖凝胶电泳法分离。