aa发酵工艺学(编辑修改稿)

aa发酵工艺学(编辑修改稿)内容摘要：

称为母体抗体（ materal antibody）或母源抗体。 三、根据与抗原反应的性质分类 完全抗体（ plete antibody）：与抗原结合后可出现沉淀反应、凝集反应等可见反应。 不完全抗体（ in plete antibody）：又称封闭抗体，能与抗原结合，不出现可见反应。 封闭抗体与抗原结合后，影响完全抗体对抗原的结合和破坏作用，对抗原起到保护作用。 四、根据抗体作用的对象分类 抗菌抗体（ antibacterial antibody）：能与相应细菌或其有效成分结合的抗体 抗病毒抗体（ antiviral antibody）：能与相应病毒结合的抗体，包括中和抗体，血凝抑制抗体等； 抗外毒素抗体（ antitoxin antibody）：能中和细菌外毒素的抗体，对由破伤风、肉毒梭菌等所产生的外毒素引起的疾病，有治疗作用； 溶血素（ hemolysin）：能与红细胞结合的抗体 抗抗体（ antiantibody）：以提纯的免疫球蛋白免疫异种动物制备的一种抗体。 抗原 —— 抗体 —— 抗抗体 第七节 人工制备抗体的种类 一、多克隆抗体（ polyclonal antibody， PcAb） 用抗原物质多次免疫动物，采取血液，分离血清，即为抗血清或免疫血清，该血清中含有多克隆抗体。 由 2 个以上的 B 细胞克隆产生的抗体。 如大肠杆菌有菌体抗原、鞭毛抗原和荚膜抗原三中抗原成分，而每一种抗原成分又有几个抗原决定簇，每一个决定簇都能刺激一个相对应的 B 细胞分化增殖，产生抗体，故血清中是多种抗体的混合物。 二、单克隆抗体（ monoclonal antibody， McAb） 1975年，英国剑桥大学的 Kohler、 Milstein 创立了淋巴细胞杂交瘤技术，育成了一株杂交瘤细胞，产生了高纯度的单一抗体 —— McAb。 被称为划时代的生物学革命， 1984年获得诺贝尔奖。 克隆（ clone）：指由一个祖先细胞分裂繁殖而形成的一个细胞系 ，系内细胞基因和性状 14 均相同。 McAb：由一个识别一种抗原决定簇的 B 细胞克隆产生的同源抗体，称为单克隆抗体。 单克隆抗体技术的基本原理及生产的基本过程 （ 1）、小鼠骨髓瘤细胞在体内、外可无限增殖，但不能分泌抗体； （ 2）、经抗原免疫的小鼠脾细胞（ B 细胞）能产生大量抗体，但在体外不能无限增殖； （ 3）、用 PEG将免疫脾细胞（使 B 细胞带有某一抗原决定簇的信息，能产生针对一种抗原决定簇的抗体）与骨髓瘤细胞融合，在 HAT 选择培养基中，只有融合的杂交瘤细胞能生长； 未融合的骨髓瘤细胞在 HAT 培养基中不能合成 DNA，而脾细胞不能在体外存活，那么，在选择培养基上生长的细胞都是融合后的细胞。 （ 4）、每个杂交瘤是用一个 B 细胞融合而产生的克隆； 每个融合细胞都是由一个 B 细胞和一个骨髓瘤细胞融合而形成的，有多个融合细胞，如何获得单一的融合细胞。 （ 5）、经抗体检测、反复克隆和培养，筛选出能产生抗体的单一的稳定的杂交瘤细胞； （ 6）、单克隆抗体的生产 小鼠腹腔中繁殖，体外细胞培养等方法，生产大量的单克隆抗体。 单克隆抗体的优点 （ 1）、单一特异性，与一个抗原决定簇反应； 高特异性 （ 2）、可重复性，抗体结构高度均一； 高纯度 （ 3）、效价高、成本低并可大量生产； 单克隆抗体的应用 （ 1）、血清学诊断 用单克隆抗体可提高血清学方法的特异性、重复性、稳定性和敏感性，少或无血清交叉反应。 （ 2）、免疫治疗 用单克隆抗体能逐个查明肿瘤抗原的各个成分，将毒素或药物与单抗（抗肿瘤细胞抗原）连接在一起，免疫毒素或生物导弹。 （ 3）、免疫学研究 :利用单克隆抗体可以更深刻、更全面的分析抗原、抗体构造。 第三章 免疫系统（ immune system） 在解剖学上，免疫系统是由淋巴器官及淋巴组织组成。 在功能上，是由各种 免疫细胞的协同作用完成的。 淋巴组织及免疫细胞分布于全身各处，以完成适宜的免疫防御功能。 免疫系统是机体执行免疫功能的组织机构，是产生免疫应答的物质基础。 免疫系统主宰机体的免疫功能，它们的存在和功能的正常，是维持机体免疫力相对稳定的保证，任何部分的缺陷或过度增生，都可引起免疫功能失调，导致抗传染能力的丧失，或引起 15 各种类型的免疫性疾病。 第一节 免疫器官（ immune an） 免疫器官：是淋巴细胞和其它免疫细胞发生、分化、成熟、定居和增殖以及产生免疫应答的场所。 执行生成免疫细胞的功能。 一 、中枢免疫器官 特点： 形成于胚胎早期； 是免疫细胞发生、分化和成熟的场所； 切除，影响免疫功能； 逐渐萎缩。 （一）、骨髓（ bone marrow） 是哺乳动物的造血和免疫器官； 骨髓是骨腔中绵软、鲜红的组织，是成人各种血液细胞再生的场所。 成人骨髓总量约为23 升，占体重的 25%。 骨髓中的多能干细胞是红细胞、淋巴细胞、粒细胞、单核巨噬细胞群的起始细胞； 骨髓也是人类和哺乳动物 B 淋巴细胞成熟的场所。 骨髓功能缺损，将严重损害机体的造血和免疫功能。 （二）、胸腺（ thymus） 哺乳动物 位于胸腔前部纵隔内，鸟类在颈静脉一侧呈多叶排列。 位于颈部气管的两侧或胸腔的前下方 是 T 淋巴细胞分化和成熟的场所； 分化 血流 胸腺激素 血流 多能干细胞 —— → 淋巴干细胞 —— → 胸腺 ———— → T 细胞 —— →外周免疫器 官的胸腺依赖区定居 T 淋巴细胞：胸腺依赖性淋巴细胞 —— Thymus dependent lymphocyte，简称 T 细胞。 胸腺的免疫功能 （ 1）、诱导 T 淋巴细胞成熟： （ 2）、产生胸腺激素： 胸腺上皮细胞分泌的，为小分 子的肽类，有胸腺血清因子、胸腺素、胸腺生成素、胸腺体液因子等，对诱导 T 细胞成熟有重要作用，还有免疫调节作用。 （三）、法氏囊（ bursa of Fabricius） 16 又称腔上囊，是禽类特有的免疫器官，位于泄殖腔的背侧； 球形结构，分皮质和髓质，鸡 34 月令最大（ 34 克） 是 B 淋巴细胞分化、成熟的场所； 分化 囊激素 血循，淋循 多能干细胞 —— → 淋巴干细胞 —— → 腔上囊 ———— → B 细胞 ———— → 外周 免疫器官的囊依赖区（非胸腺依赖区）定居 B 淋巴细胞：囊依赖性淋巴细胞 —— Bursa dependent ymphocyte 骨髓 依赖性淋巴细胞 —— Bone marrow dependent ymphocyte 某些药物、病毒可造成法氏囊萎缩或损害。 体液免疫功能降低，影响 MD、 ND 等疫苗的免疫效果。 二、外周免疫器官 先天性低免疫球蛋白症遗传病患者， 非胸腺依赖区 缺陷；先天性胸腺不发育患者， 胸腺依赖区 缺陷。 大家有体会，口腔炎，牙周炎，咽喉炎等，下颌淋巴结肿、痛 —— 淋巴细胞 分化增殖，功能旺盛体积增大，数量增加。 特点： 形成于胚胎晚期； 是 T、 B 细胞定居、增殖的场所； 是抗原刺激产生免疫应答的场所； 切除后，一般不影响免疫功能； 存在于整个成年期。 组成： 全身的淋巴结，脾脏，淋巴小结（消化道、呼吸道和泌尿生殖道）。 （一）、淋巴结（ lymph node） 分布于淋巴循环经路的各个部位，有淋巴循环及血液循环双重系统。 结构： 皮质：浅皮质区：有许多淋巴小结，其中央为生发中心； 深皮质区：副皮质区。 髓质：髓索： B 细胞，浆细胞，巨噬细胞； 髓窦：巨噬细胞。 T、 B 细胞的分 布 T 细胞：主要分布在副皮质区 —— 胸腺依赖区 B 细胞：主要分布于生发中心、皮质浅层和髓索 —— 非胸腺依赖区 17 免疫功能： 具有过滤和清除异物的作用； 是产生免疫应答的场所。 淋巴结内有淋巴循环及血液循环双重系统。 经淋巴结内的淋巴循环，将体表或内脏的病原体及异物引流至局部淋巴结，淋巴液在淋巴窦内流动缓慢，使其中的巨噬细胞有足够时间吞噬清除病原体及异物，再将“清洁”的淋巴液由输出淋巴管输出，从而在淋巴结内完成过滤作用。 巨噬细胞将病原体处理，将抗原信息传达给 T、 B 细胞，使其分化、增殖；效应 T 细胞、抗体可经血液循 环到病原微生物所在部位。 淋巴管连接外周免疫器官，形成遍布全身的淋巴管网络，其分布与血管几乎完全平行。 淋巴管网络的主要生理功能是回收经毛细血管网络渗如组织的体液和营养物质，并使淋巴细胞在体内的循环成为可能。 人体每天从淋巴网络回收的淋巴液达 23 升。 淋巴液通过引流淋巴管进入初级和次级淋巴结之后汇入主淋巴管，经胸导管进入左锁骨下静脉和血液循环。 机体局部感染常会引起引流淋巴结的肿胀，其部分原因是淋巴结中的抗原特异性 T 和 B 细胞的迅速扩增。 此外， T 细胞被活化后所分泌的各种淋巴因子会造成髓窦中巨噬细胞的聚集和体液的直 溜，导致淋巴结的进一步肿胀。 外来抗原被彻底清除之后，活化 T 和 B 细胞因失去了抗原的持续刺激而凋亡，淋巴结方得以恢复。 （二）、脾脏（ spleen） 结构 白髓：脾小体：由密集的淋巴细胞组成，其中心为生发中心； 中央动脉：贯穿于白髓的小动脉。 红髓：脾索： B 细胞，浆细胞，巨噬细胞； 脾窦：血细胞。 位于白髓的周围，脾内有血液循环，但无淋巴循环。 T、 B 细胞的分布 T 细胞：中央动脉周围； B 细胞：生发中心，脾索； 脾中 T 细胞约占 35%， B 细胞约占 55%，约 10%为巨噬细胞。 免疫功能 （ 1） 滤过血液作用 ：净化血液 90%的循环血液经过脾脏，脾索及脾窦中的 巨噬细胞 能有效直接清除病原体及衰老的红细胞，而起重要的“过滤作用”。 （ 2）免疫应答的重要场所： 当被血流来的抗原刺激后， T、 B 细胞经克隆扩增，数目明显增加（脾体积相应地扩大），产生致敏 T 细胞和浆细胞，建立细胞和体液免疫。 是体内产生抗体的主要器官（骨髓也是产生抗体的主要器官）。 18 （ 3）滞留淋巴细胞的作用：当抗原进入时，循环中的淋巴细胞被滞留。 （ 4）产生吞噬细胞增强激素：小分子肽类（ 4 个氨基酸组成），具有增强吞噬细胞和中性粒细胞的吞噬作用。 （三）、其它 淋巴组织 哈德氏腺：位于眼窝中腹部，眼球后部；是禽类特有。 雏鸡滴眼免疫，不受母源抗体的干扰。 扁桃体：见于鸡，鹅、鸭有两对淋巴结（颈胸和腰淋巴结）。 粘膜相关淋巴组织： 消化道、呼吸道和泌尿生殖道黏膜下层的许多淋巴小结和弥散淋巴组织，如肠道黏膜集合淋巴结，这些淋巴组织均含有丰富的 T 细胞、 B 细胞及巨噬细胞（ B 细胞比 T 细胞多），参与局部的黏膜免疫作用。 抗体是由外周淋巴组织产生的，主要有：骨髓，脾脏，淋巴结，扁桃体，弥散淋巴组织。 第二节 免疫细胞 免疫细胞（ immunocyte）：所有直接 或间接参与免疫应答的细胞 凡是参与机体免疫应答或与免疫应答有关的细胞 免疫细胞的种类多，各司其职，巧妙配合，相互制约，为清除机体的异物共同发挥作用。 淋巴细胞： T 细胞， B 细胞， K 细胞， NK细胞； 辅佐细胞（抗原递呈细胞）：单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞； 粒细胞：嗜中性粒细胞，嗜碱性粒细胞，嗜酸性粒细胞，肥大细胞。 免疫活性细胞（ immunopetent cell， ICC）：受抗原刺激后能分化增殖，产生特异性免疫应答的免疫细胞。 辅佐细胞 (accessory,A cells)：在免疫应答过程中起重 要的辅佐作用。 抗原递呈细胞（ antigenpresenting cells， APC）：具有捕获和处理抗原以及能把抗原递呈给免疫活性细胞的功能。 一、淋巴细胞 在体内分布广、数量多，除中枢神经系统外，所有组织均存在。 人体内淋巴细胞的总数与脑细胞或者肝细胞数量相当。 以脾脏和淋巴结等外周免疫器官为“驻扎营地”，在血液和淋巴系统之间不断循环。 人占白细胞总数的 2535%， X 109/L。 （一）、 T 细胞 T 细胞的来源与分化 19 1030d 血流 造血干细胞 — →淋巴干细胞 — →前体（祖） T 细胞 — →胸腺 —— → T 细胞 — →外周免疫 抗原 记忆细胞（长寿） ↓ ↗ 器官的胸腺依赖区定居（ T 细胞） — →淋巴母细胞 — →效。