沪科版生命科学高二上6-3基因工程与转基因生物1内容摘要:

运载体 :质粒 质粒:是细菌中独立于拟核 DNA之外,能自主复制的双链闭环的 DNA分子。 质粒 概念:独立于细菌 拟核 DNA外的,能 自主复制 的 双链闭环 的DNA分子。 ◆ 质粒 DNA分子上含有特殊的遗传标记基因,如: 抗四环素抗性基因 抗青霉素抗性基因 ◆ 在宿主细胞内可以独立复制,也可以组合到宿主细胞的DNA分子中 质粒与目的基因重组: 限制酶剪开 与切目的基因的限制酶是否为同一种。 质粒保留部分 质粒切除部分 三、基因工程的步骤: • 请根据你的理想,自己设计获取该生物的基因工程步骤。 你目前最想获得什么样的生物。 三、基因工程的步骤: • 1、获取目的基因: 目的基因:人胰岛素基因 获取方法: 直接分离法 人工合成法 目的基因 ——是人们为了得到其表达产物而把它转入到 新的生物体中去的基因 从生物体 细胞中分离 通过化学方 法人工合成 获得目的 基因的方法 步骤 基因定位 (确定目的基因在 DNA上的位子) 用限制酶从 DNA分子中切取 mRNA DNA 方法 逆转录酶 • 目的基因与运载体重组 人的胰岛素基因与质粒重组 • 重组 DNA分子导入受体细胞 受体细胞:大肠杆菌 植物细胞、动物细胞、微生物细胞 • 筛选含目的基因的受体细胞: 目的基因的检测和表达 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 细菌的检测,将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。 淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 筛选 含目的基因的受体细胞 将重组 DNA分子导入受体细胞的频率一般仅在 10 7左右。 得到目的基因的 受体细胞极少 ,大量的是未 成功导入的细胞。 需要从这样巨大的细胞群体。
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