20xx人教版高中生物选修三12基因工程的基本操作程序ppt同步课件

20xx人教版高中生物选修三12基因工程的基本操作程序ppt同步课件内容摘要：

1)PCR技术不需要解旋酶 ，但需利用 90～ 95 ℃ 高温使 DNA分子解旋。 (2)PCR技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列 ,以便根据这一序列合成引物。 (3)PCR技术需要耐高温的 DNA聚合酶 要点二 基因表达载体的构建 ：使目的基因在受体细胞中稳定存在 ， 并且可以遗传给下一代 ， 使目的基因能够表达和发挥作用。 (1)启动子：一段有特殊结构的 DNA片段，位于基因的首端。 它是 RNA聚合酶识别和结合的部位，可驱动基因转录。 (2)目的基因：编码相关蛋白质 ， 形成基因工程产品或产生新的生物性状。 (3)终止子：一段有特殊结构的 DNA短片段 ,位于基因的尾端 ， 作用是使转录在所需要的地方停止。 (4)标记基因：一般为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因 (目的基因是否导入成功 )。 (1)对受体细胞无害 ， 不影响受体细胞的正常生理活动； (2)能自我复制 ， 能通过复制进行基因扩增； (3)具有标记基因 ， 以便于鉴定目的基因是否进入受体细胞； (4)重组 DNA大小应适合，以方便操作。 特别提醒 (1)用同一种限制酶切割质粒和含目的基因的 DNA分子的目的是产生相同的黏性末端 ， 便于两者完成拼接。 (2)终止子与终止密码子的区别 ① 终止子是 DNA分子上决定转录停止的一段DNA序列 ， 其组成单位是脱氧核苷酸； ②终止密码子是指 mRNA分子上决定翻译停止的三个相邻碱基，其组成单位是核糖核苷酸。 (2020南师大附中高二检测 )如图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶 EcoRⅠ 、 BamHⅠ 的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因， tetR为四环素抗性基因 ,P为启动子， T为终止子， ori为复制原点。 已知目的基因的两端分别含有包括 EcoRⅠ 、BamHⅠ 在内的多种酶的酶切位点。 例 2 (1)将含有目的基因的 DNA与质粒表达载体分别用 EcoR Ⅰ 酶切，酶切产物用 DNA连接酶进行连接后，其中由两个 DNA片段之间连接形成的产物有 ________________、________________、 ________________三种。 若要从这些连接物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行 ______________________ ______________________________________。 (2)用上述 3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中 ， 能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________。 (3)目的基因表达时， RNA聚合酶识别和结合的位点是 ________，其合成的产物是________________________________________________________________________。 (4)在上述实验中 ， 为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接 ,酶切时应选用的酶是 ________。 【 答案 】 (1)目的基因 — 载体连接物 载体— 载体连接物 目的基因 — 目的基因连接物 分离纯化 (2)载体 — 载体连接物 (3)启动子 mRNA (4)EcoRⅠ 和 BamHⅠ (只答一种酶不可 ) 【 误区警示 】 (1)切割质粒和目的基因的。