检验科真菌实验室sop文件

检验科真菌实验室sop文件内容摘要：

淀部分由于培养也可镜检。 其他体液标本：胸水、腹水和关节腔积液应收集于含有少量肝素抗凝（ 1： 1000）的无菌容器中，标本离心沉淀部分培养。 持续腹透的病人引流液应用不含肝素的无菌容器收集。 脓：无菌注射器抽取，脓液中有颗粒应注意收集。 骨髓： 35ml 抽取标本放入含有少量肝素抗凝（ 1： 1000）的无菌容器中。 组织：应放入灭菌生理盐水中，应尽可能自损害中心或边缘取材，有可能应全部切除小的皮肤损害、皮下或粘膜损害。 2. 标本接种 试管接种：酒精灯火焰加热接种环或接种针灭菌，试管在火焰上快速通 过 23 次，打开试管塞，挑取少量标本，于沙氏的斜面中三点接种，试管口再次在火焰上快速通过 23 次，用胶塞封口。 平板接种：酒精灯火焰加热接种环或针，挑取少量标本接种于平板。 3. 标本转种 根据标本鉴定 需要某些菌种需要转种其他培养基，如皮肤癣菌培养基、马 铃薯 — 葡萄糖培养基。 4. 菌种鉴定 根据不同菌种的生长特点（如生长速度、颜色、菌落大小等），镜检观察 染色后（如乳酸酚棉蓝或苯胺蓝）菌丝及孢子的特点。 5. 鉴定不清的菌种可采用 PCR 技术鉴定 6. 真菌药敏试验 酵母样真菌及丝状真菌药敏试验方法按照美国临床试验室标准化研究所（ CLSI/NCCLS）指南进行操作和判读结果。 方法有：稀释法和 KB 法 E 试验法按照说明操作，按照美国临床试验室标准化研究所（ CLSI/NCCLS）指南判读结果。 7. 结果报告 报告种名 常用真菌培养基 一、 沙氏培养基 1. 成分： 葡萄糖 40g，蛋白胨 10g，琼脂 10g，蒸馏水 1000ml，。 2. 制法： （ 1）葡萄糖及蛋白胨放入 1000ml 的三角烧瓶内。 （ 2）把琼脂肪放在 300ml 的蒸馏水中溶解，用纱布滤过并补足 1000ml蒸馏水倒入三角烧瓶内，封好。 （ 3） 8 磅 15 分钟或 10 磅 10 分钟灭菌。 （ 4）无菌操作分装如玻璃试管制成斜面。 （ 5） 4 度冰箱中保存，使用半小时前取出，自制培养基保存不得超过一 月。 3. 用途：真菌培养的常规培养基 二、 沙氏液基 1. 成分： 葡萄糖 40g，蛋白胨 10g，蒸馏水 1000ml。 2. 制法： （ 1）葡萄糖及蛋白胨、蒸馏水放入 1000ml 的三角烧瓶内，封好。 （ 2） 8 磅 15 分钟或 10 磅 10 分钟灭菌。 （ 3）无菌操作分装在培养管或特殊容器中。 （ 4） 4 度冰箱中保存，使用半小时前取出，自制培养基保存不得超过一 月。 3. 用途：分离白色念珠菌。 可以提供完整菌落，为制备菌落素提供材料。 三、 沙氏保存培养基 1. 成分： 蛋白胨 10g，琼脂 10g，蒸馏水 1000ml。 2. 制法： （ 1）葡萄糖及蛋白胨放入 1000ml 的三角烧瓶内。 （ 2）把琼脂肪放在 300ml 的蒸馏 水中溶解 （ 3）用纱布滤过并补足 1000ml 蒸馏水倒入三角烧瓶内，封好。 （ 4） 8 磅 15 分钟或 10 磅 10 分钟灭菌。 （ 5）无菌操作分装如玻璃试管制成斜面。 （ 6） 4 度冰箱中保存，使用半小时前取出，自制培养基保存不得超过一 月。 3. 用途：菌种再次培养基上生长缓慢，可保存菌种用。 四、 皮肤癣菌培养基 1. 成分： 蒸馏水 1000ml，植物蛋白胨 10g，葡萄糖 10g，琼脂 20g，酚红溶液 40ml， 盐酸 6ml，放线菌酮 ，庆大霉素 ，金霉素。 2. 制法： （ 1）植物蛋白胨、葡萄糖、琼脂加入 1000ml 水中，溶解 （ 2）加 40ml 酚红溶液（酚红 ，溶于 NaOH 中加水至 100ml） （ 3）加入 盐酸并振荡 （ 4）放线菌酮 溶于 2ml 丙酮中倒入热的培养基振荡。 （ 5）庆大霉素 溶于。