微生物学检验细菌的培养与分离技术(编辑修改稿)内容摘要:
★ 培养温度: 35℃ (采用恒温培养箱) ★ 培养时间: 18~ 24h 二氧化碳培养法:烛缸法、二氧化碳培养箱 厌氧培养法:厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等 细菌在 固体 培养基中的生长现象 菌落 ★ 定义:指单个细菌在平板培养基上生长繁殖,形成单一肉眼可见的细菌集团。 ★ 菌落特征:大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 ★ 菌落类型:光滑型( S)、粗糙型( R)、黏液型( M) 菌苔:指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。 细菌在 液体 培养基中的生长现象 混浊 沉淀:多见于链状排列的细菌 菌膜:多见于厌氧菌 细菌在 半固体 培养基中的生长现象 有鞭毛细菌:在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌:只沿穿刺线生长,穿刺线边缘清晰。 菌 落 菌落与菌苔 细菌在液体培养基中的生长现象 细菌在半固体培养基中的生长现象 有动力 现象 无动力 现象 常用细菌生化反应试验 糖醇类代谢试验 糖发酵试验 甲基红试验 VP试验 葡萄糖氧化/发酵试验( O/F试验) 七叶苷水解试验 Β-半乳糖苷渗透酶试验 糖发酵试验 原理 多糖 - →单糖 - →丙酮酸 - →酸性产物(或产酸产气 )- →pH↓ - →指示剂呈酸性变色 (若产气者有气泡出现 ) 培养基:糖发酵管、半固体发酵管、微量发酵管 试剂:酚红、溴甲酚紫等 结果 :培养基呈酸性变色 应用:观察细菌对糖度的 分解情况,常用于肠道杆菌的鉴定 糖发酵试验结果判断 反应现象 结果描述 酸性 变色 、有气泡 分解 糖产酸、产气 酸性 变色 、无气泡 分解 糖产酸、不产 气 培养基不变色 不分解 糖 甲基红试验 原理:细菌分解糖,产生丙酮酸,进一步生成大量混合酸,使培养基 pH维持在,加入甲基红后,使甲基红呈现红色反应。 此为甲基红试验 阳性。 培养基:葡萄糖蛋白胨水 试剂:甲基红试剂 结果:加入试剂后,。微生物学检验细菌的培养与分离技术(编辑修改稿)
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聚糖 G-菌肽聚糖 青霉素 作用点 溶菌酶作用点 课件制作 陆曙梅 G+菌细胞壁 G-菌细胞壁 细胞膜 肽聚糖 外 膜 磷壁酸 脂多糖 G+菌和 G菌细胞壁比较 课件制作 陆曙梅 G+菌和 G菌细胞壁比较 G+菌 G菌 细胞壁强度 坚韧、致密 较疏松 细胞壁厚度 厚 较薄 肽聚糖层数 50多层 1~ 2层 肽聚糖含量 50~ 80% 5~ 10% 磷壁酸 有 无 外膜层 无 有 课件制作 陆曙梅
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,以确定是否为 O1群 确定血清型:与分型诊断血清作玻片凝集,以确定血清型别 确定生物型: 第 Ⅳ 组噬菌体裂解试验 多粘菌素 B敏感试验 鸡红细胞凝集试验 溶血试验 课件制作 陆曙梅 副溶血性弧菌-- 生物学性状 革兰阴性杆菌,或微弯,单端鞭毛,无芽孢,无荚膜 营养要求 不高,嗜盐性,最适盐浓度 %NaCl,无盐培养基不生长 TCBS:形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象+