外文翻译--运用实时pcr技术监测生物浸出黄铜矿中的嗜热微生物的数量(编辑修改稿)

外文翻译--运用实时pcr技术监测生物浸出黄铜矿中的嗜热微生物的数量(编辑修改稿)内容摘要：

分别为 107个细胞毫升 1 X射线衍射分析结果表明，浸出群落残留 1， 4和 5主要包括黄铜矿，黄钾铁矾，硫酸铅矿和二氧化铅。 然而，黄钾铁矾是由没有发现残留的非生物浸出控制，群落 2和 3。 在非生物浸出渣控制主要包含 黄铜矿，硫酸铅矿，并导致二氧化碳，而浸出渣的主要群落 2和 3载有黄铜矿，黄铁矿，硫酸铅矿 ,再导致氧化。 验证 PCR产物的特异性 常规 PCR扩增的产物质量用 ％（ w/v）的琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色进行检查。 每个 PCR产物中包含一个单片段预期的大小（图 2），结果揭示了 BLAST分析（数据未显示），该 PCR产物序列比较一致，都是100％，这证明了扩增的 DNA片段正确的。 熔解曲线分析表明，荧光信号同时获得一个实时 PCR检测起源从具体的 PCR产物，而不是从人造的引物二聚体。 实时 PCR检测数据分析表明，单一的熔 融峰对应于标准的 DNA观察了所有样本（数据未显示）。 实时 PCR检测验证 所有的标准曲线具有很高的相关系数，类似的扩增效率，以及类似的斜率（见表 2）。 PCR扩增特定的16SrRNA基因是基于其非特异性，同 16S rRNA基因样本相比较在这项研究中的其他物种。 该实验，测试在扩增的 16S rRNA的特异性 DNA存在和 105的所有其他副本的情况下本研究的物种进行了研究。 观察到无明显差异在存在和缺乏竞争的非特异性引物的 DNA与所有测试的基础上荧光扩增图谱指数（数据未所示）。 结果表明，该方法可用于检测和 量化提取样本含有混合菌种目标 DNA。 为了进一步验证实时 PCR检测，个别 16S rRNA基因扩增的标准（每个为 104拷贝 /测试）从 4不同的物种，包括 At. caldus s2, YSK, F. thermophilum L1, and 用特异性引物扩增及其复印件数字是计算参照各自的标准曲线。 结果表明，拷贝数经检测，估计在实际的匹配副本因子 （表 2），表明了实时 PCR方法可用于量化混合的 DNA样本个别 16S rRNA基因。 黄 铜矿浸出嗜酸系统中温和嗜热细菌实时定量 PCR技术 实时 PCR法用于跟踪微生物群落 4和第 5浸矿环境。 渗滤液样品撤回后 15日和第 28天。 分析结果表明，群落 4的群落结构在生物浸出急剧变化过程（图 3）。 虽然 3株菌株在群落 4日开始有相同的细胞数， At. caldus s2and L. ferriphilum YSK共占超过 99％的生物浸出体系中的总原核生物中间阶段。 F. thermophilum L1仅在后期和 16S rRNA基因的拷贝数占 22％的总拷贝检测中发现。 分析结果表明，群落 4的群落结构在生物浸 出急剧变化过程（图 3）。 虽然 3株菌株在群落 4日开始有相同的细胞数， At. caldus s2and L. ferriphilum YSK共占超过 99％的生物浸出体系中的总原核生物中间阶段。 F. thermophilum L1仅在后期和 16S rRNA基因的拷贝数占 22％的总拷贝检测中发现。 At. caldus s2 and Sulfobacillus sp. LN都是在浸矿微生物系统 5中占主导。 L. ferriphilum YSK 5 的 16S rRNA基因拷贝总数在的从中期阶段的 20％的中下降至尾期约 2％。 相 比之下， 16S rRNA基因 F. thermophilum L1 的在最后阶段拷贝数占 41％，虽然中间阶段 F. thermophilum L1的比例是在群落中最小。 讨论 实时 PCR分析，所有的标准曲线具有较高的相关系数和类似的斜率。 此外，设计特异性引物 PCR扩增效率是适当的（见表 2）。 因此，被允许作为标准曲线使用。 单熔融峰表明，引物二聚体有没有像人造的一样。 此外，中度嗜热嗜酸使用在研究中只包含一到两个拷贝的 16S rRNA基因 每个基因组（刘等人。 2020年）。 16S rRNA基因的变异每一株副本应大致代表的人口动力。 因此，实时 PCR检测可申请快速检测和定量变化中的嗜热细菌浸出涉及温和黄铜矿。 在本研究中使用的 Ferroplasma （冲部等。 2020年）到。 他们也往往选择建造 39。 逻辑设计 39。 群落在 4060℃（罗林斯和约翰逊 2020年）。 L. ferriphilum YSK是自养氧化中度嗜热菌。 据说在 At. caldus s2的可能贡献，间接地通过产生酸性硫化物矿物氧化，并经删除元素硫，否则可能损害溶解过程形成钝化 层（多普森与林斯特龙， 1999年）。 Ferroplasma菌。 是铁氧化嗜酸古细菌，而且似乎是一个非常不同的组微生物（多普森等人。 2020年。 Golyshina等人。 2020年。 Hawkes et al. 2020).F. thermophilum L1是一个混合营养嗜热温和古菌。 Sulfobacillus藻中 LN的是混合营养铁，用硫氧化和嗜热。 生物淋滤的硫化物有两种基本的机制。 直接的机制，它本来是该矿物硫官能团是生物氧化硫酸盐检测无任何中间。 与此相反，在所谓的间接机制，它基本上包括铁的氧化反应（三） 在金属硫离子解散。 在这个化学反应，铁（ II）离子和元素硫（ S8的）应产生。 然后，这些化合物是生物氧化为铁（ III）离子和硫酸。 硫酸盐的生产也造成了减少垃圾渗滤液的 pH值（ Sand et al. 2020）。 在浸出过程中，形成钝化层认为是由矿物表面上的黄钾铁矾沉淀，作为溶解缓慢的原因，钝化更大的阻碍是限制矿物表面层铜萃取流动的细菌，营养盐，氧化剂，反应从产品和（斯托特等。 2020沃特林 2020年）。 在我们的实验中，溶解黄铜矿也经历了类似的变化。 据初步在浸矿体系 pH值的增加是由于酸溶解和氧化亚铁。 由于硫氧化元 素硫氧化细菌和黄钾铁矾的形成， pH值开始下降生物浸出后 5天的环境。 可溶性铁铁浓度下降后， 20天的生物浸出 系统 1， 4和 5，因为黄钾铁矾沉淀。 群落 2没有群落 3有效。 少量酵母提取物为 F. thermophilum L1在实验室中生长所必须的，并可能为其提供生长因子，但在其自然的环境中，像真菌等微生物可能提供这一增长因子（多普森等人。 2020年）。 相较于群落含 L. ferriphilum，群落 2和 3似乎有效地减少由黄铜矿浸出铜。 ferriphilum具有较高的比生长速率和亚铁嗜热氧化速度比楼，这在导致浸出效率更 高。 该群落 4比群落 1有较高的浸出效率，表明。 相较于群落包含两个或三个不同的物种生理中度嗜热嗜酸，更复杂的群落 5为最高浸出效率。 微生物浸矿过程中的动态应与细菌浸出的环境是一致的。 其中包括硫元素和许多 polythionate。